附录 干扰素效价测定
采用CPE(细胞致病效应)抑制为基础的抑制微量测定法，以每ml干扰素检品的最高稀释度仍能保护半数细胞(50)免受病毒攻击的稀释度的倒数定为干扰素单位。以国际单位(IU)表示，并用国家标准品校正结果。
1 细胞培养
将新鲜传代24～48小时的Wish细胞(人羊膜细胞)以约35万/ml的浓度另入96孔组织培养板上，每孔100μl，置37℃5%CO2孵箱中培养4～6小时。
2 样品稀释与细胞混合
干扰素检品做4倍系列稀释，每份检品做6个稀释度(如100万单位，则测4-12～4-7)每个稀释度加2孔，与培养板中的细胞等量混合，置37℃5%CO25%CO2孵箱培养18～24小时。
3 加病毒
倒掉培养板中的上清液，以100CCID50/ml的浓度加入VSV(水泡性口腔炎病毒)，每孔100μl，37℃5%CO2孵箱培养24小时左右。
4 观察结果
显微镜下观察细胞病变，若病毒对照各孔细胞出现75%～1000%的明显病变和死亡(变圆、死亡、脱落(，而细胞对照组中的细胞仍生长良好(病变=0)，则表明对照系统合格，结果成立。
5 计算
通常可按Reed?/FONT>Muench法计算，其步骤如下：
(1)计算保护百分比
稀释度
病变平均值(每孔)
正常平均值(每孔)
累积数
比例
百分比(%)
病变
正常
正常/病变+正常
4-1
0
4
0
13
13/13
100
4-2
0
3
0
9
9/9
100
4-3
1
2
1
5
5/6
83
4-4
2
2
3
2
2/5
40
4-5
4
0
7
0
-
-
4-6
4
0
11
0
-
-
(2)求出干扰素单位
距离比=(·高于50%的百分数-50)/(高于50%的百分数-低分50%百分数)=(83-50)/(83-40)=33/43=0.77
即此批干扰素稀释到4-3。77(1∶186)时能保护半数细胞免受攻击病毒损害。此批干扰素效价为186单位，经国家标准品修正，得出干扰素的国际单位(以IU表示)。
1 细胞培养
将新鲜传代24～48小时的Wish细胞(人羊膜细胞)以约35万/ml的浓度另入96孔组织培养板上，每孔100μl，置37℃5%CO2孵箱中培养4～6小时。
2 样品稀释与细胞混合
干扰素检品做4倍系列稀释，每份检品做6个稀释度(如100万单位，则测4-12～4-7)每个稀释度加2孔，与培养板中的细胞等量混合，置37℃5%CO25%CO2孵箱培养18～24小时。
3 加病毒
倒掉培养板中的上清液，以100CCID50/ml的浓度加入VSV(水泡性口腔炎病毒)，每孔100μl，37℃5%CO2孵箱培养24小时左右。
4 观察结果
显微镜下观察细胞病变，若病毒对照各孔细胞出现75%～1000%的明显病变和死亡(变圆、死亡、脱落(，而细胞对照组中的细胞仍生长良好(病变=0)，则表明对照系统合格，结果成立。
5 计算
通常可按Reed?/FONT>Muench法计算，其步骤如下：
(1)计算保护百分比
稀释度
病变平均值(每孔)
正常平均值(每孔)
累积数
比例
百分比(%)
病变
正常
正常/病变+正常
4-1
0
4
0
13
13/13
100
4-2
0
3
0
9
9/9
100
4-3
1
2
1
5
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4-4
2
2
3
2
2/5
40
4-5
4
0
7
0
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4-6
4
0
11
0
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(2)求出干扰素单位
距离比=(·高于50%的百分数-50)/(高于50%的百分数-低分50%百分数)=(83-50)/(83-40)=33/43=0.77
即此批干扰素稀释到4-3。77(1∶186)时能保护半数细胞免受攻击病毒损害。此批干扰素效价为186单位，经国家标准品修正，得出干扰素的国际单位(以IU表示)。